Применение Авертеля в повышенных дозах

06 июля 2018

В жизни периодически происходят ситуации, когда лекарственные препараты вводятся животным некорректно. Это происходит по различным причинам: невнимательно прочитанная инструкция, не прочитанная инструкция, не грамотно взвешенное животное и т.д. – в результате доза вводимого препарата оказывается или завышена или наоборот занижена. В случае занижения дозы максимум, что может случиться – это препарат не окажет терапевтического действия. А вот что произойдет в организме животного, если доза лекарственного препарата окажется завышенной? Какие могут быть последствия? К чему готовиться?

Для ответа на этот вопрос мы провели следующий эксперимент по оценке переносимости лекарственного препарата, когда Авертель вводился животным (в данном случае собакам) в завышенной дозе и многократном применении.

Материалы и методы

Авертель представляет собой инъекционный препарат широкого спектра действия для лечения паразитарных инфекций у собак и кошек (нематодозы, цестодозы, инвазии, вызванные эктопаразитами).

В качестве действующих веществ содержит аверсектин С1 (в 1 мл 50 мг) и празиквантел (в 1 мл 500 мг).

Аверсектин С1 представляет собой комплекс авермектинов В1, В2, А1и А2в определенном соотношении.

Максимальная рекомендуемая однократная доза составляет 0,5 мг по аверсектину С1 и 5 мг по празиквантелу.

Таблица 1

Дизайн эксперимента

Группа	Вид животных	Кол-во животных в группе	Дозы	Объем раствора для введения, мл/животное	Режим введения
11	собаки беспородные	5	терапевтическая доза	1,0 – 1,5	подкожно, в область загривка, чередуя с одной и другой стороны, в течение 7 суток с интервалом 24 ч
22	собаки беспородные	5	трехкратная терапевтическая доза	3,0 – 4,5	подкожно, в область загривка, чередуя с одной и другой стороны, в течение 7 суток с интервалом 24 ч
33	собаки беспородные	5	вода для инъекций в сравнимом объеме	3,0 – 4,5	подкожно, в область загривка, чередуя с одной и другой стороны, в течение 7 суток с интервалом 24 ч

Исследования проводили на базе приюта «Эко» (поселок Некрасовка, московской области) в период с апреля по июнь 2013 года. Эксперимент проводили на беспородных собаках массой тела 10-15 кг обоих полов. Всего при проведении опыта было задействовано 15 собак, которые были разделены на 3 группы по 5 животных в каждой. Содержание животных было групповым. Температура в помещении равнялась 20±2°С; влажность воздуха составляла 65±5%; животных содержали при девятичасовом освещении. Собак кормили сухим кормом. Потребление воды было не ограниченным.

Собаки не подвергались обработке другими лекарственными препаратами.

Схема проведения опыта

Переносимость лекарственного препарата Авертель оценивали при введении препарата собакам (условно здоровым) в двух дозировках: в терапевтической (0,1 мл/кг массы тела (0,5 мг/кг по аверсектину С1 и 5 мг/кг по празиквантелу)) и трехкратной 0,3 мл/кг массы тела (1,5 мг/кг по аверсектину С1 и 15 мг/кг по празиквантелу) терапевтической дозах.

Из 15 собак сформировали две опытные группы и одну контрольную группу. Собакам группы 1 и группы 2 препарат Авертель вводили подкожно в указанных дозах в область загривка (чередуя с одной и другой стороны).

Считаем необходимым обсудить контроль в настоящем опыте. Несмотря на наличие контрольной группы (в которой собаки получали воду для инъекций), эти животные в большей степени служили для сравнений общего характера, например, поведенческих реакций, реальным контролем служили сами опытные животные. То есть состояние и поведение собак, а также результаты определения клинических, гематологических и биохимических показателей сравнивали с периодом до введения Авертеля. Полагаем, что в данном случае это наиболее удачная модель для клинического (описательного) и статистического сравнения полученных результатов.

До, во время введения испытуемого препарата и после этого периода наблюдали за общим состоянием и поведением животных; ежедневно обследовали место введения препарата.

До введения (0 сутки) и через 1; 5 и 10 суток после последнего введения препарата Авертель отбирали пробы крови в пробирки с антикоагулянтом и без для определения гематологических и биохимических показателей (пробы крови исследовались в лаборатории «Шанс БИО», г. Москва). Таким образом, в настоящем опыте имелся десятидневный восстановительный период «отдыха» от препарата, который позволил оценить возможные более дальние последствия введения препарата.

Результаты

Общее состояние и поведение животных

Прежде всего, отметим весьма важные, на наш взгляд, результаты тщательных ежедневных наблюдений за животными, участвующими в эксперименте, по которым складывается впечатление о его безопасности.

В ходе опыта оценивали общее состояние и особенности поведения собак во время и после введения препарата Авертель.

В результате можно заключить, что поведение собак двух опытных групп ничем не отличалось по сравнению с исходным периодом, а сами собаки не выделялись среди контрольной группы, содержащихся вместе с ними и не получавшими препарат.

Животные были активны, подвижны, внимательны, выполняли команды и т.д. Очень важным показателем хорошей переносимости испытуемого препарата служил тот факт, что собаки охотно потребляли предлагаемый им корм и воду.

Препарат представляет собой раствор для инъекций, и вводится в довольно больших объемах (особенно в трехкратной терапевтической дозе), поэтому ежедневно обследовали место введения. Воспалительная реакция в месте инъекции Авертеля в терапевтической дозе отсутствовала на все сроки исследований, несмотря на многократное введение препарата. Однако примерно через 1 час после каждого введения Авертеля в трехкратной дозе отмечали появление припухлости. При ее пальпации не наблюдалось болезненности, повышенной температуры и т.д. Через 1-2 суток припухлость рассасывалась без какого-либо лечебного вмешательства.

Помимо внешних наблюдений проводили более объективную оценку воздействия испытуемого препарата на организм собак по ряду гематологических и биохимических показателей.

Гематологические показатели

Как следует из представленных данных в таблицах 2 и 3, подкожное введение препарата Авертель в двух тестированных дозах (терапевтической и тройной терапевтической) не привело к достоверным изменениям каких-либо гематологических показателей.

Приведем показательные примеры. На 1 сутки после последнего введения препарата уровень гемоглобина у собак, получивших терапевтическую и трехкратную терапевтическую дозу, равнялся соответственно 155,00±8,87; 154,00±2,61 (г/л); количество эритроцитов — 8,19±0,45; 7,66±0,05 (1012/л);

количество тромбоцитов — 402,00±1,82; 403,80±25,19 (109/л);

на 5 сутки

уровень гемоглобина равнялся 158,40±5,77; 139,40±3,43 (г/л);
количество эритроцитов — 7,11±0,92; 6,35±0,48 (1012/л);
количество тромбоцитов — 324,60±34,70; 304,60±27,41 (109/л);

на 10 сутки

уровень гемоглобина равнялся 162,40±4,79; 156,00±8,60 (г/л);
количество эритроцитов — 8,25±0,40; 7,64±0,41 и (1012/л);
количество тромбоцитов — 361,60±30,01; 430,80±37,29 (109/л)

против исходных значений (до обработки животных) 161,60±5,48; 148,60±5,87 (г/л); 9,12±0,32; 7,44±0,21 (1012/л) и 422,80±19,38; 358,60±18,42 (109/л).

К приведенному анализу также необходимо добавить, что во всех случаях не изменялась лейкоцитарная формула крови.

Результаты определения показателей периферической крови у собак контрольной группы через 1; 5 и 10 суток после последнего введения воды для инъекций в сравнении с исходным периодом (0 сутки) приведены в таблице 4. Как мы уже отмечали, статистическую обработку данных проводили в сравнении с исходным периодом. Однако даже беглый анализ таблиц позволяет отметить, что все тестированные показатели имели примерно одинаковый порядок значений.

Таким образом, спустя 1; 5 и 10 суток после последнего введения испытуемого препарата ни один тестированный показатель состояния периферической крови не подвергся статистически значимым изменениям по сравнению с исходным периодом.

Биохимические показатели

В настоящем опыте анализировали 12 параметров, традиционно считающихся в клинической биохимии показателями функционального состояния ряда органов, систем и сторон обмена веществ.

Анализ начнем с представления показателей, характеризующих функцию печени. К ним относятся: активность ферментов печени аланинаминотрансферазы и аспартатаминотрансферазы (АСТ и АЛТ), уровень билирубина (общего и прямого) и некоторые другие.

В данном случае при введении препарата Авертель в двух дозах ни один из указанных показателей не подвергся статистически значимым изменениям. В частности, при введении препарата в терапевтической дозе через 1; 5 и 10 суток после последней инъекции активность ферментов АСТ и АЛТ у собак, равнялась соответственно 47,00±1,45, 36,60±4,65, 38,40±3,03 и 45,60±2,60, 53,00±6,83 и 47,40±3,33 против соответствующих начальных значений 48,00±3,16 и 37,80±2,67 Е/л. Аналогичные показатели собак, получавших препарат в трехкратной терапевтической дозе, равнялись соответственно 54,60±3,97, 40,00±3,36; 44,40±3,33 и 41,20±5,47, 41,20±5,15 и 43,60±3,61 против соответствующих исходных значений 47,80±2,48 и 47,80±5,00 Е/л.

С учетом приведенных данных можно прийти к обоснованному выводу, что многократное введение обоих препаратов не оказало влияния на функцию печени.

Рассмотрим данные, характеризующие функцию почек, они касаются содержания в сыворотке крови мочевины и креатинина.

Через 1; 5 и 10 суток после последнего введения препарата Авертель в двух дозах отсутствовали изменения этих показателей, которые можно было бы трактовать как статистически значимые. Так, уровень мочевины после введения препарата в терапевтической дозе на 1; 5 и 10 сутки составил 5,46±0,48, 7,50±1,19, 5,40±0,37 против начального значения 6,26±0,21 ммоль/л. Концентрация креатинина после введения препарата равнялась 79,60±5,10, 81,60±4,70, и 77,80±7,53 по сравнению с начальным значением 72,20±4,48 мкмоль/л (таблица 1.2.4).

Уровень мочевины после введения препарата в трехкратной терапевтической дозе составил 5,06±0,97, 4,70±0,78, и 5,30±0,50 против начального значения 7,14±1,01 ммоль/л. Концентрация креатинина после введения препарата в повышенной дозе равнялась 75,60±6,93, 69,20±1,77 и 67,80±1,24 по сравнению с начальным значением 68,80±2,94 мкмоль/л.

Однако при введении Авертеля в терапевтической и повышенной дозах активность лактатдегридрогеназы подверглась статистически значимым изменениям на 1 сутки после окончания введения препарата (159,60±10,44 и 271,20±18,73 Е/л по сравнению с соответствующими контролями в исходном периоде). Однако уже спустя 5 и 10 суток активность этого фермента в обоих случаях была сопоставима с контрольными значениями. Интересно отметить, что достоверное снижение активности ЛДГ в этот же период имело место и у собак, получавших воду для инъекций на 1 сутки. Таким образом, скорее всего изменение активности ЛДГ связано, например, с изменением кормления собак в данный период времени.

Обсуждение и выводы

Прежде всего, ценность настоящего эксперимента заключается в том, что переносимость препарата Авертель оценивалась на том виде животных, для которого он рекомендован к применению.

Введение испытуемого препарата не оказало отрицательного влияния на общее состояние, поведение и прием корма у собак по сравнению с периодом до начала опыта и в сравнении с контрольными животными, не говоря уже о том, что гибель животных отсутствовала во всех случаях.

Если проанализировать результаты определения гематологических и биохимических показателей, то, прежде всего, следует отметить, что детектированные изменения весьма немногочисленны по своей совокупности. В частности, при введении испытуемого препарата в обеих дозах было установлено статистически значимое снижение активности лактатдегидрогеназы (смотри приведенный выше комментарий).

Как отмечалось выше, при введении Авертеля в рекомендованной терапевтической дозе местной реакции препарата не отмечали. Такой вывод базируется не только на результатах тщательного обследования места инъекций (внешний осмотр, пальпация), но и на отсутствии у собак системных реакций, например, лейкоцитоза и изменения лейкоцитарной формулы. Однако при введении испытуемого препарата в трехкратной дозе отмечали появлении припухлости (за счет больших объемов введения), которая быстро рассасывалась после прекращения введения Авертеля. Лейкоцитоз отсутствовал и в данном случае.

В итоге мы пришли к следующему обоснованному заключению: препарат Авертель хорошо переносился собаками при ежедневном введении в терапевтической и трехкратной терапевтической дозах в течение 7 суток.

Таблица 2

Гематологические показатели у собак на 0; 1; 5 и 10 сутки после последнего введения препарата Авертель в терапевтической дозе

(0,1 мл/кг массы тела (0,5 мг/кг по аверсектину С1 и 5 мг/кг по празиквантелу) в течение 7 суток (n = 5; р ≥ 0,05)

№	Показатель	Сутки/среднее значение ± средняя арифметическая ошибка (М±m),t-критерий
№	Показатель	0 сутки	1 сутки	5 сутки	10 сутки
1	Гематокрит (%)	59,24±1,77	53,75±2,12 t = 1,78	56,82±1,64 t = 0,90	55,04±1,08 t = 1,81
2	Гемоглобин (г/л)	161,60±5,48	155,00±8,87 t = 0,56	158,40±5,77 t = 0,35	162,40±4,79 t = 0,10
3	Эритроциты (1012/л)	9,12±0,32	8,19±0,45 t = 1,52	7,11±0,92 t = 1,84	8,25±0,40 t = 1,51
4	Среднее содержание гемоглобина в эритроците (пг)	20,08±0,18	19,28±0,30 t = 2,04	24,32±1,88 t = 2,01	20,11±0,20 t = 0,10
5	Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (%)	279,40±2,34	271,39±4,42 t = 1,43	371,42±48,49 t = 1,70	283,24±1,41 t = 1,26
6	Средний объем эритроцита (мкм3)	71,70±0,56	70,97±0,51 t = 0,86	65,31±2,72 t = 2,05	70,52±0,55 t = 1,34
7	Показатель анизоцитоза эритроцитов (%)	20,41±0,34	20,78±0,24 t = 0,79	23,75±1,28 t = 2,24	23,73±2,02 t = 1,45
8	Лейкоциты (109/л)	13,08±1,17	13,23±1,68 t = 0,06	11,40±0,56 t = 1,16	12,46±1,26 t = 0,32
9	Тромбоциты (109/л)	422,80±19,38	402,00±11,82 t = 0,81	324,60±34,70 t = 2,21	361,60±30,01 t = 1,53
Лейкоцитарная формула
10	Палочкоядерные нейтрофилы (%)	2,80±1,02	2,60±0,24 t = 0,17	4,20±0,66 t = 1,03	4,20±0,20 t = 1,20
11	Сегментоядерные нейтрофилы (%)	46,60±2,82	38,20±2,46 t = 2,01	51,40±1,03 t = 1,43	49,60±2,58 t = 0,70
12	Эозинофилы (%)	1,00±0,55	2,40±0,51 t = 1,67	1,00±0,45 t = 0	0,80±0,20 t = 0,31
13	Моноциты (%)	3,20±0,37	5,00±0,71 t = 2,01	4,20±1,24 t = 0,69	4,20±0,49 t = 1,45
14	Лимфоциты (%)	45,80±2,29	50,20±1,66 t = 1,39	38,60±2,20 t = 2,03	39,00±2,59 t = 1,76
15	Базофилы (%)	0,60±0,24	1,60±0,51 t = 1,58	0,80±0,37 t = 0,40	2,20±0,86 t = 1,60
Р ≤ 0,05 при tкритическом = 2,31

Таблица 3

Гематологические показатели у собак на 0; 1; 5 и 10 сутки после последнего введения препарата Авертель в трехкратной терапевтической дозе

(0,3 мл/кг массы тела (1,5 мг/кг по аверсектину С1и 15 мг/кг по празиквантелу) в течение 7 суток

(n = 5; р ≥ 0,05)

№	Показатель	Сутки/среднее значение ± средняя арифметическая ошибка (М±m), t-критерий
№	Показатель	0 сутки		1 сутки		5 сутки		10 сутки
1	Гематокрит (%)	53,57±1,88		55,98±0,36 t = 1,13		48,10±4,68 t = 0,97		53,95±2,60 t = 0,10
2	Гемоглобин (г/л)	148,60±5,87		154,00±2,61 t = 0,75		139,40±3,43 t = 1,21		156,00±8,60 t = 0,79
3	Эритроциты (1012/л)	7,44±0,21		7,66±0,05 t = 0,88		6,35±0,48 t = 1,86		7,64±0,414 t = 0,39
4	Среднее содержание гемоглобина в эритроците(пг)	19,70±0,49		19,55±0,43 t = 0,20		22,66±1,15 t = 2,12		20,38±0,46 t = 0,91
5	Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (%)	271,36±5,47		268,55±3,01 t = 0,40		328,79±36,36 t = 1,40		286,19±3,88 t = 1,98
6	Средний объем эритроцита (мкм3)	71,95±0,52		69,78±2,37 t = 0,80		67,95±3,01 t = 1,17		70,29±0,51 t = 2,04
7	Показатель анизоцитоза эритроцитов (%)	20,24±0,26		20,39±0,28 t = 0,35		23,21±1,32 t = 1,97		21,05±0,25 t = 2,01
8	Лейкоциты (109/л)	16,14±0,12		16,47±0,52 t = 0,55		14,69±0,71 t = 1,82		15,45±1,03 t = 0,60
9	Тромбоциты (109/л)	358,60±18,42		403,80±25,19 t = 1,30		304,60±27,41 t = 1,46		430,80±37,29 t = 1,55
Лейкоцитарная формула
10	Палочкоядерные нейтрофилы (%)		2,00±0,84		3,60±0,24 t = 1,64		1,00±0,45 t = 0,94		3,60±0,51 t = 1,46
111	Сегментоядерные нейтрофилы(%)		46,20±1,83		45,20±4,71 t = 0,18		48,60±7,07 t = 0,29		47,60±2,20 t = 0,44
112	Эозинофилы (%)		2,40±0,87		3,20±0,20 t = 0,80		0,20±0,20 t = 2,20		2,00±0,55 t = 0,35
113	Моноциты (%)		2,80±0,58		5,80±1,07 t = 2,21		3,60±0,68 t = 0,80		5,00±0,71 t = 2,15
114	Лимфоциты (%)		44,20±2,99		40,80±5,28 t = 0,50		45,60±8,39 t = 0,14		40,00±3,54 t = 0,81
115	Базофилы (%)		2,40±1,12		1,40±0,24 t = 0,78		1,40±0,40 t = 0,75		1,80±0,20 t = 0,47
Р ≤ 0,05 при tкритическом = 2,31

Таблица 4

Гематологические показатели у собак на 0; 1; 5 и 10 сутки после последнего введения воды для инъекций в течение 7 суток.

Контрольная группа (n = 5; р≥0,05)

№№	Показатель		Сутки/среднее значение ± средняя арифметическая ошибка (М±m),t-критерий
№№	Показатель		0 сутки	1 сутки	5 сутки	10 сутки
1	Гематокрит (%)		56,31±3,48	55,54±4,49 t = 0,12	47,04±4,46 t = 1,47	52,05±3,43 t = 0,78
2	Гемоглобин (г/л)		146,60±9,69	147,60±11,55 t = 0,06	147,40±3,14 t = 0,07	147,40±10,08 t = 0,05
3	Эритроциты (1012/л)		7,82±0,43	7,35±0,57 t = 0,59	6,70±0,18 t = 2,16	7,00±0,52 t = 1,09
4	Среднее содержание гемоглобина в эритроците(пг)		19,49±0,12	19,72±0,26 t = 0,71	21,31±0,77 t = 2,08	20,07±0,30 t = 1,60
5	Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (%)		269,44±0,33	268,97±3,09 t = 0,13	300,95±26,25 t = 1,07	274,63±8,44 t = 0,55
6	Средний объем эритроцита (мкм3)		72,13±0,56	72,38±0,35 t = 0,34	68,68±2,08 t = 1,43	71,55±0,27 t = 0,84
7	Показатель анизоцитоза эритроцитов (%)		20,07±0,16	20,19±0,25 t = 0,37	22,10±0,92 t = 1,95	20,45±0,05 t = 1,97
8	Лейкоциты (109/л)		14,63±2,55	14,39±2,62 t = 0,06	9,54±0,38 t = 1,77	11,75±1,86 t = 0,82
9	Тромбоциты (109/л)		381,80±7,66	401,00±4,15 t = 1,97	392,80±13,35 t = 0,64	374,80±48,49 t = 0,13
Лейкоцитарная формула
10		Палочкоядерные нейтрофилы(%)	3,60±0,51	3,60±0,24 t = 0	2,00±0,45 t = 2,11	5,20±1,46 t = 0,92
11		Сегментоядерные нейтрофилы(%)	47,20±1,07	49,80±4,07 t = 0,55	53,00±7,27 t = 0,71	48,40±3,14 t = 0,32
12		Эозинофилы(%)	1,40±0,51	2,80±0,73 t = 1,40	1,00±0 t = 0,70	0,80±0,49 t = 0,76
13		Моноциты(%)	5,60±0,68	6,80±0,97 t = 0,91	5,20±1,11 t = 0,27	4,40±0,68 t = 1,12
14		Лимфоциты(%)	40,20±1,32	35,20±4,69 t = 0,92	37,00±7,34 t = 0,38	38,20±3,85 t = 0,44
15		Базофилы(%)	2,00±0,63	1,80±0,37 t = 0,18	1,80±0,58 t = 0,16	3,00±0,32 t = 0,89
Р ≤ 0,05 при tкритическом= 2,31

Таблица 5

Биохимические показатели сыворотки крови у собак на 0; 1; 5 и 10 сутки после введения препарата Авертель в терапевтической дозе