Влияние Авертеля на неспецифическую резистентность

Оценка показателей естественной резистентности организма после применения препаратов имеет большое значение для общей их оценки эффективности.

Изучение сенсибилизации к лекарственным препаратам вызвано необходимостью определения, является ли это вещество аллергеном и может ли вызвать аллергическую патологию при его применении. Определение аллергизирующей активности противопаразитарного препарата особенно важно, т.к. сами паразиты уже являются очень сильным аллергеном.

Материалы и методы

Настоящие исследования были проведены в кинологическом питомнике ЛИУ-4 и клубе служебного собаководства «Волкодав» (г. Махачкала) совместно с ВИГИС в апреле июле 2013 года.

В опыте принимали участие беспородные собаки обоих полов массой тела 10-15 кг. Животные были поделены на 3 группы по 6 собак в каждой. В первую группу (собак) подобрали зараженных животных со смешанной инвазией (нематоды и цестоды). Вторую и третью группу (по 6 голов) сформировали из собак, у которых после трехкратного исследования фекалий не было обнаружено яиц гельминтов в пробах и их считали «условно здоровыми», т.е. незараженными. Собакам 1 и 2 группы препарат вводили в рекомендуемой терапевтической дозе в объеме 0,1 мл/кг однократно, подкожно. Собакам 3 группы Авертель вводили в трехкратной терапевтической дозе в объеме 0,3 мл/кг.

Кровь для исследований у собак отбирали до обработки испытуемым препаратом и на 7; 15 и 30-е сутки после однократного введения Авертеля.

Показатели неспецифической резистентности включали: лизоцимную активность и содержание циркулирующих комплексов.

Лизоцимную активность сыворотки крови определяли фотоэлектроколориметрическим методом. В качестве индикатора активности лизоцима применяли суточную культуру Micrococcus lysodectis, выращенную на мясо-пептонном агаре («Методические рекомендации по изучению влияния антгельминтиков на иммунный статус при гельминтозах», 1989).

Количественный анализ циркулирующих иммунных комплексов проводили с использованием метода, основанного на селективной преципитации ЦИК 3,75% полиэтиленгиколем с последующим измерением оптической плотности преципитата на спектрофотометре «Specol» при длине волны 450 нм («Методические рекомендации по изучению влияния антгельминтиков на иммунный статус при гельминтозах», 1989). Результаты выражали в условных единицах оптической плотности.

Авертель оценивали на аллергизирующее действие в реакции непрямой дегрануляции тучных клеток. Препарат вводили в терапевтической и трехкратной терапевтической дозах. Для постановки теста использовали тучные клетки, полученные от интактных белых крыс.

Результаты

Оценка неспецифической резистентности организма собак после обработки лекарственным препаратом Авертель

Обработка Авертелем, как следует из данных таблицы, не оказала отрицательного влияния на эти показатели у незараженных собак при введении им испытуемого препарата в терапевтической и в три раза увеличенной дозе. Активность лизоцима в сыворотке крови у животных колебалась без значительных изменений в течение всего срока наблюдений (30 суток: 23,90±3,17÷24,83±2,56 - 23,70±2,12÷24,61±2,08%, концентрация ЦИК также не претерпевала каких-либо значительных изменений – 71,83±4,01 - 74,60±3,26 и 69,87±2,45 - 74,29±3,17 (ед.опт.пл.).

У инвазированных собак происходит интенсивное формирование циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) и, по-видимому, более высокое содержание на 0 сутки и последующее увеличение их концентрации на 7 сутки после дегельминтизации до 123,7±5,24 ед.опт.ед., связано с дополнительным попаданием в кровь антигенов гельминтов до и после их гибели в результате лечения; у собак 2 и 3 группы этот показатель был значительно ниже – 73,53±3,19÷72,94±2,97 ед.опт.пл. и колебался в этих пределах на протяжении 30 суток.

Однако через 15 суток уровень ЦИК в крови собак 1 группы снизился и составил 87,93±4,03 ед.опт.пл. Через месяц после дегельминтизации содержание ЦИК у собак 1 группы составило 79,53±3,78 ед.опт.ед., что уже не отличалась от значений у незараженных собак после введения препарата в терапевтической дозе – 72,02±3,28 ед.опт.ед.

Активность сывороточного лизоцима была снижена у собак 1 группы до обработки препаратом и составляла на 7 сутки после дегельминтизации (в последнем случае 16,63±1,94%, в то время, как у незараженных животных – 24,83±2,56 и24,61±2,08%, что в 1,44 раза выше).

Однако уже через две недели данный показатель вырос и составил 20,13±2,69%. К 30 суткам активность лизоцима достигла 22,07±2,92%, что практически не отличалось по сравнению с показателями собак 2 и 3 групп – 24,63 ± 2,45 и 24,09±1,24%.

Таким образом, после освобождения животных от инвазии в результате обработки Авертелем регистрировалась положительная динамика показателей естественной резистентности: приближался к фоновым значениям уровень циркулирующих иммунных комплексов и активность лизоцима. У незараженных собак введение антгельминтика не вызывало отрицательного воздействия на изучаемые показатели естественной резистентности организма. Более наглядно результаты исследования представлены в таблице.

Показатели естественной резистентности организма

собак после обработки Авертелем (Р≤0,05) (М±m)

Группы животных (n=6)	Результаты исследований (М±m); сутки после дегельминтизации
	0	7	15	30
ЦИК, ед.опт.пл.
1	116,43±7,45*	123,7±5,24*	87,93±4,03	79,53±3,78
2	74,60±3,26	73,53±3,19	71,83±4,01	72,02±3,28
3	71,87±2,45	72,94±2,97	72,45±3,22	74,29±3,17
Сывороточный лизоцим, %
1	18,10±2,33*	16,63±1,94*	20,13±2,69	22,07±2,92
2	23,90±3,17	24,83±2,56	24,53±3,01	24,63±2,45
3	23,70±2,12	24,61±2,08	23,83±2,27	24,09±1,24
* Р≤0,05

Оценка сенсибилизирующих свойств лекарственного препарата Авертель

При исследовании сывороток крови от собак, которым Авертель вводили однократно в терапевтической дозе, реакцией непрямой дегрануляции тучных клеток, мы не отметили положительно реагирующих животных – уровень дегранулированных тучных клеток в пробах достигал 6,46±0,34 по сравнению с 5,83±0,67% у контрольных собак

У двух собак (породы немецкая овчарка) из шести, получивших препарат в трехкратной терапевтической дозе, при тестировании отмечена слабоположительная реакция, и процент дегранулированных клеток в их пробах крови составил 10,67 и 11,33. Но в целом по группе результат был на уровне 7,47±4,06% и 5,83±0,67% в контроле. Реакция была оценена как отрицательная, поскольку значения не выходили за рамки отрицательной оценки теста (не более 10%).

Таким образом, применение комбинированного противопаразитарного препарата Авертель в терапевтической и трехкратной дозах не вызывает аллергизации организма животных, хотя, по-видимому, возможна индивидуальная повышенная чувствительность.

Непрямая реакции дегрануляции тучных клеток (n=6) (Р≤0,05) (М±m)

Вариант опыта; дозы	Результаты исследований (%) (M±m)
Авертель	Опыт	Контроль
1 ТД	6,46±0,34	5,83±0,67
3 ТД	7,47±4,06	5,83±0,67

Заключение

Лекарственный препарат Авертель не оказывает отрицательного влияния на неспецифическую резистентность у собак и не вызывает аллергизации организма.